运动训练和白藜芦醇保护NAFLD大鼠肝细胞凋亡的内质网应激机制研究

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目的:研究运动训练和白藜芦醇(RVS)干预对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠血脂代谢、肝细胞凋亡及内质网应激(ERS)相关蛋白表达的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠70只分为普通安静对照组(NC)、NAFLD模型组(HF)、HF小强度耐力运动组(LE)、HF中等强度耐力运动组(ME)、HF递增强度耐力运动组(IE)、HF白藜芦醇组(RVS)、中等强度耐力运动联合RVS组(RE),共7组,每组各10只。运动组每次运动时间60 min,每周运动5天。RVS灌胃按照40mg/kg/天,每周7天。干预6周后测试血脂指标和分析肝组织HE切片;免疫组化测试Bax、Bcl-2蛋白表达;TUNEL测试肝细胞凋亡情况;采用Western-blot检测肝组织ERS相关因子GRP78、Caspase3、IRE1、p-IRE1、JNK1、CHOP、PERK和eIF2α蛋白表达。结果:与HF组相比,所有干预组均降低NAFLD大鼠血清TG、TC、FFA、LDL-c含量和肝细胞的凋亡率和Bax蛋白表达,同时增加了HDL-c含量和Bcl-2表达;与HF组相比,内质网跨膜蛋白IRE1、PERK蛋白表达和GRP78/Caspase3比值显著增加,Caspase3、p-IRE1、eIF2α、JNK1和CHOP蛋白表达显著降低,综合运动组中各指标发现,ME组较LE和IE效果好,而RE组则优于其他各组。结论:1)16周高脂饮食可复制NAFLD大鼠模型,NAFLD大鼠肝细胞凋亡的发生与ERS同时激活IRE1/JNK1和eIF2α/CHOP两条信号通路有关;2)不同强度耐力运动对NAFLD大鼠血脂各项指标和肝细胞凋亡均有不同程度的改善作用,但中等强度耐力运动优于其他运动组,这可能依赖于对ERS信号途径IRE1/JNK1和eIF2α/CHOP双重调控;3)RVS对NAFLD大鼠肝细胞凋亡也具有改善作用,但并非依赖于对ERS凋亡途径的调控;4)联合干预组对ERS信号通路IRE1/JNK1和eIF2α/CHOP也具有双重抑制作用,且优于中等强度耐力运动组。
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