【摘 要】
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目的：利用RT-PCR方法扩增日本裂体吸虫HMGB1基因，构建原核表达载体。方法：日本裂体吸虫尾蚴感染纯种新西兰兔后8周，检获肠系膜下静脉血管中的成虫；匀浆成虫，提取总RNA，经RT—PCR扩增
【机 构】
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长治医学院人体寄生虫学教研室,长治医学院肝病研究所,中南大学湘雅医学院
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目的：利用RT-PCR方法扩增日本裂体吸虫HMGB1基因，构建原核表达载体。方法：日本裂体吸虫尾蚴感染纯种新西兰兔后8周，检获肠系膜下静脉血管中的成虫；匀浆成虫，提取总RNA，经RT—PCR扩增出含SiHMGB1的目标片段，克隆于pMD-19T载体，转化DH5a大肠杆菌增殖克隆，测序鉴定。以pMD-19T—sjHMGB1为模板进行二次PCR扩增，分别获得$HMGB1、A-box和B-box片段，经BamHI＋Xho工双酶切消化PCR产物，分别亚克隆至高效蛋白表达载体pET-26b（4-）。结果：用RT—P
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