【摘 要】
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目的 探讨5-杂氮-2\'-脱氧胞苷(5-Aza)对结直肠癌细胞株HT29、HCT116的增殖抑制及诱导凋亡作用机制.方法 应用细胞增殖检测法(MTT)检测不同浓度(0～100 μmol/L)5-Aza作用HT29、HCT116细胞24、48、72 h的细胞增殖变化;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度5-Aza处理HT29、HCT116细胞株24 h的细胞凋亡情况;利用Western blot检测磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路蛋白、甲基化CpG
【机 构】
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中山大学附属第七医院科研中心,广东深圳518107
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目的 探讨5-杂氮-2\'-脱氧胞苷(5-Aza)对结直肠癌细胞株HT29、HCT116的增殖抑制及诱导凋亡作用机制.方法 应用细胞增殖检测法(MTT)检测不同浓度(0～100 μmol/L)5-Aza作用HT29、HCT116细胞24、48、72 h的细胞增殖变化;采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测不同浓度5-Aza处理HT29、HCT116细胞株24 h的细胞凋亡情况;利用Western blot检测磷酯酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路蛋白、甲基化CpG结合蛋白-3(MBD3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、cleaved caspase-3、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的蛋白表达变化.结果 与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(10、15、20、25、50、100 μmol/L) HT29、HCT116细胞增殖抑制率均升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性.与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(25、35、50μmol/L)HT29、HCT116细胞凋亡率均升高(P＜0.05),且呈剂量依赖性.与空白对照组比较,5-Aza药物处理组(10、30 μmol/L)HT29、HCT116细胞MBD3、p-PI3K、p-Akt、caspase-3蛋白表达显著降低,cleaved caspase-3和cleaved PARP蛋白表达显著升高,且呈剂量依赖性.结论 5-Aza可抑制结直肠癌HT29、HCT116细胞增殖并促进细胞凋亡,其作用机制可能与其抑制PI3K/Akt信号通路活化,并抑制MBD3蛋白表达有关.
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