【摘 要】
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用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白(hTM)基因,将其克隆到带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到表达质粒pEF-TM.在转染pEF-TM的COS-1细胞中,hTM
【机 构】
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中国科学院发育生物学研究所中科院分子发育生物学重点实验室
【基金项目】
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国家“8 63”资助项目;国家自然科学基金重大项目(3 9993 43 0 )
论文部分内容阅读
用PCR方法从人的基因组DNA中扩增了人血栓调节蛋白(hTM)基因,将其克隆到带有人EF-1α启动子的pEF-neo哺乳动物表达载体上,得到表达质粒pEF-TM.在转染pEF-TM的COS-1细胞中,hTM得到了瞬时表达,并且正确地定位到细胞膜上.用pEF-TM转染猪内皮细胞(PEC),经G418筛选得到稳定转染的克隆.凝血活性测定结果显示,表达hTM的PEC凝血时间明显延长,表明其抗凝血能力增强.通过显微注射方法,得到了1只F0代hTM转基因小鼠.Southern杂交结果表明,该转基因小鼠整合了9个拷贝
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