【摘 要】
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目的 观察沉默、过表达CG5844基因的果蝇S2胚胎细胞中的剪接体组分(U2A)表达变化.方法 ①沉默CG5844基因表达的果蝇S2胚胎细胞CG5844基因及U2A表达观察取S2细胞分为观察A、对
【机 构】
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江苏大学附属医院,江苏镇江,212001;江苏大学附属医院
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目的 观察沉默、过表达CG5844基因的果蝇S2胚胎细胞中的剪接体组分(U2A)表达变化.方法 ①沉默CG5844基因表达的果蝇S2胚胎细胞CG5844基因及U2A表达观察取S2细胞分为观察A、对照A组,分别转染siCG5844-1(CG5844 siRNA,可沉默CG5844基因表达)、空白质粒.转染48 h时采用qRT-PCR法检测细胞CG5844基因,免疫荧光法检测细胞U2A.②CG5844过表达的果蝇S2胚胎细胞CG5844基因及U2A表达观察取S2细胞分为观察B、对照B组,分别转染pUAS-attB-CG5844(可过表达CG5844基因)、载体pUAS-attB.转染48 h时采用qRT-PCR法检测细胞CG5844基因,免疫荧光法检测细胞U2A.结果 观察A、对照A组CG5844基因相对表达量分别为0.29±0.04、1.00±0,二者比较,P<0.05;观察A、对照A组U2A相对表达量分别为11.34±0.58、1.65±0.23,二者比较,P<0.05.观察B、对照B组CG5844基因相对表达量分别为18.87±2.44、1±0,二者比较,P<0.05;观察B、对照B组U2A相对表达量分别为1.30±0.07、2.17±0.06,二者比较,P<0.05.结论 沉默CG5844基因的S2细胞中的U2A表达升高,过表达CG5844基因的S2细胞U2A的表达降低.CG5844可能通过调控U2 A的表达,影响剪接体的功能,从而调控果蝇生殖干细胞的发生.
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