【摘 要】
：
以重组环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)表达菌株BL21(DE3)作为研究对象,比较IPTG和乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase量的影响,确定优化诱导方式。以Geobacillus CHB1的基因组D
【机 构】
：
福州大学生物科学与工程学院,福建省农业科学院土壤肥料研究所
【基金项目】
：
国家公益性农业科研专项(201303094-05);福建省财政厅社会公益研究项目(2060302);福建省科技计划项目-省属公益类科研院所基本科研专项(2009R10002-2);福建省星火计划项目(2012S0061);2013年院创新团队编号CXTD-2-1318
论文部分内容阅读
以重组环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)表达菌株BL21(DE3)作为研究对象,比较IPTG和乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase量的影响,确定优化诱导方式。以Geobacillus CHB1的基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆CGTase基因;利用分子操作技术构建携带有大肠杆菌Omp A信号肽的分泌型表达质粒p EASY-E2-Omp A-CGT,重组质粒热激转化至Escherichia coli BL21中进行表达;在摇瓶发酵条件下,分别以IPTG和乳糖作为诱导剂,通过SDSPAGE分析和测定胞外酶活,确定优化诱导方式。CGTase基因在Escherichia coli BL21中实现表达,且具有一定量的重组CGTase分泌至胞外;乳糖诱导的蛋白表达量优于IPTG诱导,不易形成包涵体;乳糖最佳的诱导起始菌浓度OD600为1.4,诱导浓度、温度分别为0.5%和25℃,分批流加乳糖5次和一次性加入,重组CGTase表达量无明显差异;经初步优化,胞外酶活达19.87 U/m L。Geobacillus CHB1 CGTase基因在大肠杆菌中成功实现胞外表达,乳糖可替代IPTG诱导重组CGTase。
其他文献
<正>2012年11月20-23日,中国城市广播电视创新发展高峰论坛于闻名全国的"盐之都、龙之乡、灯之城"——四川自贡市隆重举行。作为我国最早的23个建制市之一,自贡市乃国家历史
利用OM、SEM及EDS等手段,研究了均匀化退火对电解铝液直接铸轧3003铝合金冷轧板显微组织的影响。结果表明,均匀化退火前的3003铝合金冷轧板组织中存在较多粗大的针片状FeAl3
纳税评估在税款征收管理过程中,具有非常重要的作用,有助于强化税源管理,最大程度地降低税收风险,避免税款发生流失问题,从而促进税收征管效率与质量不断提升。不过,因受多种
讨论了半导体PN结的温度特性及其测温实验的设计。可将此内容改编成工科大学物理设计性实验项目。
负摩阻力及中性点的定义表明,负摩阻力沿桩身(从桩顶两侧到中性点位置)的变化并不均匀,其间应存在一个最大值,最近的黄土地基浸水湿陷试验证明了这一点。本文利用该试验的资
发展低碳经济是对现有经济发展方式的根本性改变。针对石化工业存在的高能耗、高污染、装置经济技术水平偏低、低碳能力较弱、布局较分散、二氧化碳气体减排措施相对滞后等一
目的通过对某部队院校一起夏季腺病毒感染疫情发生发展及防控过程的分析,为部队防控腺病毒提供参考。方法对2018年7月驻石家庄某部队院校发生的腺病毒疫情的发生经过、处置过
智能电网的发展为充分发挥需求响应资源的作用提供了技术支撑。需求响应是电力用户根据市场的价格信号或激励机制主动调整用电方式,以保证系统运行的安全性和可靠性,还可节能
在语言教学中，引进审美意境的培养作为教学手段可以使形象的认识能力与素质培养和语言知识结合．形成一个紧密的育人体系，使得学生的语言学习目的不仅是掌握语言知识和技能，更重要