先心病婴幼儿骨髓间充质干细胞向心肌样细胞诱导分化的实验研究

来源 :中华小儿外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong450
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目的 探讨先心病婴幼儿骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)向心肌样细胞诱导分化的可行性,为心肌组织工程提供新的种子细胞的来源.方法无菌条件下抽取先天性心脏病婴幼儿胸骨骨髓3~5 ml,经密度梯度离心(Percoll分离液,T为1.073),接种获得BMSCs,常规培养.流式细胞仪检测细胞表面抗原.将已传2代的细胞应用5-氮杂胞苷(5-Azacytidine,5-Aza)诱导24 h,更换为完全培养基(LG-DMEM)后继续培养,2周后行免疫细胞化学及透射电镜行超微结构检查.结果先心病婴幼儿BMSCs基本上为梭型成纤维细胞样形态,表面标记为CD29、CD44、CD71、CD90表达阳性,CD3、CD14、CD34、CD45、HLA-DR不表达.BMSCs经5-Aza诱导2周后α-actin,Desmin,cTnI,Cx-43免疫细胞化学染色阳性,透射电镜示诱导后的细胞有明显的肌丝,单个细胞核呈椭圆形,位于细胞的中央.结论先心病婴幼儿骨髓间充质干细胞可在体外经5-Aza诱导分化为心肌样细胞,有望成为应用自体细胞体外构建工程化心肌重要的种子细胞。

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