淫羊藿甙对体外钛微粒诱导破骨细胞骨吸收功能的影响

来源 :中国中医骨伤科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yanyongchao
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目的:探讨淫羊藿甙对钛微粒诱导的体外培养的破骨细胞骨吸收功能的影响。方法:用巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)和核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-kB ligan,RANKL)诱导破骨细胞前体RAW 264.7细胞为破骨细胞,MTT法检测不同浓度淫羊藿甙对RAW 264.7细胞增殖的影响,得出最佳浓度。实验分为正常培养基的钛微粒处理组、含淫羊藿甙的钛微粒处理组和空白对照组,48h后收集细胞,采用ELISA法检测培养液中细胞核因子k B活化因子受体的浓度(receptor activator of NF-kB,RANK),用实时荧光定量PCR法检测抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)、基质外金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、碳酸酐酶Ⅱ(carbonic anhydraseⅡ,CAⅡ)、组织蛋白酶K(Cathepsin K,CtsK)mRNA的表达;Western Blot法检测TRAP、RANK、CtsK蛋白的表达。设置同样的实验组与骨磨片共培养,甲苯胺蓝染色计算骨吸收陷窝的数目和面积。结果:淫羊藿甙可明显下调钛微粒诱导的RAW 264.7细胞和细胞液中RANK的表达,TRAP、MMP-9、CAⅡ、CtsKmRNA和蛋白的表达,并减少骨磨片上骨吸收陷窝的数目和面积。结论:淫羊藿甙可抑制钛颗粒体外诱导破骨细胞的骨吸收,有望成为防治人工关节无菌性松动的药物。
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