【摘 要】
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为揭示miRNA对番茄灰霉菌胁迫的响应机制,以番茄茉莉酸(JA)缺失突变体def1、spr2及其野生型(CM)为试验材料,构建了3个材料接种灰霉菌前后(0h、48h)2个时期的miRNA文库,并采用
【机 构】
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大连民族大学环境与资源学院,辽宁大连116605承德市蔬菜技术推广站,河北承德067000;沈阳农业大学园艺学院,设施园艺省部共建教育部重点实验室,沈阳110866;
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为揭示miRNA对番茄灰霉菌胁迫的响应机制,以番茄茉莉酸(JA)缺失突变体def1、spr2及其野生型(CM)为试验材料,构建了3个材料接种灰霉菌前后(0h、48h)2个时期的miRNA文库,并采用Illumina平台测序,对测序数据进行生物信息分析,结合实时荧光定量检测目的miRNA及其预测的靶基因表达情况.结果 表明灰霉菌侵染番茄后,JA缺失突变体def1和spr2的病情指数显著高于CM,H2O2含量低于CM.高通量测序鉴定了130个已知miRNA和811个新miRNA.进一步筛选出8个保守miRNA (Sly-miR156e-3p、Sly-miR166c-5p、 Sly-miR171f、 Sly-miR172b、 Sly-miR319a、Sly-miR390b-5p、Sly-miR399b、Sly-miR482d-5p),其在6个样本中表达模式各异.预测差异miRNA靶基因122个,结合qRT-PCR技术分析了8个miRNA和8个靶基因的表达情况,与高通量测序结果基本一致.推测Sly-miR156e-3p、Sly-miR390b-5p、Sly-miR399b、Sly-miR482d-5p通过依赖JA信号途径参与番茄对灰霉病的抗性.
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