【摘 要】
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通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2（ALDH2）基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21（DE3）后经IPTG诱导,SDS-PAGE分
【机 构】
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武汉工程大学绿色化工过程教育部重点实验室
【基金项目】
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湖北省国际科技合作重点计划项目（2006CA013）, 湖北省科技攻关计划项目（2007AA201C27,2007AA301B24）
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通过双酶切、连接转化等方法将人乙醛脱氢酶2（ALDH2）基因克隆至载体pGEX-4T-1上,构建原核表达重组质粒pGEX-4T-1-ALDH2。重组质粒转化至E.coli BL21（DE3）后经IPTG诱导,SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到大量表达。由于此载体本身带有融合蛋白标签GST（谷胱甘肽转移酶）,所以得到了部分可溶性的目的蛋白。通过对表达条件进行探讨,发现在28℃下,以终浓度0.1mmol·L^-1的IPTG诱导表达10h,可溶性的目的蛋白约占总蛋白的25%。表明,融合蛋白标签GST
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