论文部分内容阅读
目的观察三明治构型大鼠原代肝细胞长期培养的形态学变化，并对其功能进行测定。方法采用改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞，台盼蓝拒染实验观察细胞活力，利用三明治培养构型培养成年大鼠原代肝细胞，倒置显微镜下连续观察肝细胞的形态学变化，定期收集培养细胞上清液，检测所培养肝细胞的分泌及生物转化功能，并与单层胶原培养肝细胞比较。结果平均每个鼠肝可获取（2～3）×10。个肝细胞，存活率为（93±3）％；体外肝细胞培养第3天，细胞活力、清蛋白分泌功能恢复到最佳状态；三明治构型培养第7天，地西泮