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SOE-PCR二步法构建shRNA干扰质粒

来源 :实验室研究与探索 | 被引量 : 0次 | 上传用户：disk_

【摘 要】

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通过拼接重叠延伸PCR（SOE-PCR）二步法成功地建立了一种方便的shRNA干扰质粒的构建方法.将目的基因——半胱亚磺酸脱羧酶（CSD）特异性的shRNA序列用SOE-PCR二步法插入到pEGFP-HI-sh

【作 者】

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范晶晶 郑秋闿 

【机 构】

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潍坊学院生物与农业工程学院,潍坊学院山东省高校生物化学与分子生物学重点实验室,潍坊学院化学化工与环境工程学院

【出 处】

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实验室研究与探索

【发表日期】

：

2013年9期

【关键词】

：

SOE-PCR SHRNA RNA干扰 半胱亚磺酸脱羧酶 SOE-PCR  double-stranded RNA（shRNA） RNA inter feren 

【基金项目】

：

国家星火计划项目（2012GA740030）,山东省自然科学基金项目（ZR2010CL024）,潍坊市科学技术发展计划（20111118,20121307）,潍坊学院博士基金项目（2010BS04）

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通过拼接重叠延伸PCR（SOE-PCR）二步法成功地建立了一种方便的shRNA干扰质粒的构建方法.将目的基因——半胱亚磺酸脱羧酶（CSD）特异性的shRNA序列用SOE-PCR二步法插入到pEGFP-HI-shRNA质粒中,经菌液PCR、酶切、测序鉴定,证明pEGFP-H1-CSD shRNA干扰质粒与预期结果一致,可以用于细胞转染和RNA干扰实验.采用本方法能快速、高效构建RNA干扰质粒,为研究基因功能提供帮助.

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