酪氨酸激酶受体B介导的卵巢上皮性癌OVCAR3细胞失巢凋亡抑制与其侵袭的关系

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目的 探讨失巢凋亡抑制因子酪氨酸激酶受体B(TrkB)介导的卵巢上皮性癌(卵巢癌)OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制与其侵袭的关系.方法 采用RT-PCR和实时定量PCR技术检测4种细胞包括3种不同病理类型的卵巢癌细胞系OVCAR3、SKOV3(两者均为卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞系)和ES2(卵巢透明细胞癌细胞系)细胞及神经母细胞瘤细胞系sK-N-DZ细胞中,以及经不同方式[贴壁培养和立体培养(培养后形成团簇细胞)]培养的OVCAR3细胞中TrkB mRNA的表达.转染TrkB小分子干扰RNA(siRNA)后,流式细胞仪检测OVCAR3细胞的凋亡率,以转染无意义的(scrambled)siRNA者为阴性对照;体内、体外侵袭实验检测不同方式培养的OVCAR3细胞的侵袭能力.结果 (1)OVCAR3细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0240±0.0017,明显高于SKOV3细胞的0.0030±0.0006、ES2细胞的0.0027±0.0009及SK-N-DZ细胞的0.0087±0.0003(P<0.01);OVCAR3团簇细胞中TrkB mRNA表达水平为0.0437±0.0021,明显高于贴壁细胞的0.0240±0.0017(P<0.01).(2)转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞的凋亡率为(46.3±5.9)%,明显高于阴性对照的(9.0±0.8)%(P<0.01).(3)体外侵袭实验显示,OVCAR3团簇细胞的穿膜细胞数为(71.8±0.8)个,明显多于贴壁细胞的(47.7±0.8)个(P<0.01);体内侵袭实验显示,转染TrkB siRNA后,OVCAR3细胞在裸鼠体内形成的肿瘤体积为(6.0±1.4)mm3,明显小于阴性对照的(16.3±4.7)mm3(P<0.01).结论 TrkB可能通过诱导卵巢癌OVCAR3细胞的失巢凋亡抑制而赋予其高侵袭能力。

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