【摘 要】
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目的探讨在大肠杆菌中表达可溶性重组日本血吸虫谷胱甘肽孓转移酶(rSj26 GST)的优化条件。方法用含有Sj26基因的原核表达载体pGEX-3X转化大肠杆菌BL21(DE3),将影响可溶性rSj26 GST
【机 构】
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华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室,湖北省十堰市郧阳医学院
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目的探讨在大肠杆菌中表达可溶性重组日本血吸虫谷胱甘肽孓转移酶(rSj26 GST)的优化条件。方法用含有Sj26基因的原核表达载体pGEX-3X转化大肠杆菌BL21(DE3),将影响可溶性rSj26 GST表达的4个因素,即温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时细菌的密度和诱导时间进行正交设计,确定其优化表达条件并大量表达,采用谷胱甘肽亲和层析法纯化表达的蛋白,测定酶活性,通过Western blot鉴定免疫活性。结果正交设计的直观分析和方差分析结果显示:可溶性rSji26 GST最佳表达条件为温度25℃,IP
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