人未成熟睾丸组织体外生殖细胞发育的实验研究

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目的

初步探讨人未成熟睾丸组织在体外培养条件下其生殖细胞发育情况。

方法

截取睾丸肿瘤术中的瘤旁睾丸组织进行体外培养,分别培养4~17周后苏木素伊红(HE)染色观察培养睾丸组织的组织学结构,测量曲细精管横截面积和直径,RT-PCR检测Piwil2基因在培养组织中的表达,免疫组化检测Piwil2蛋白在生殖细胞中的表达。

结果

人睾丸组织培养初期(4周)曲细精管横截面积和直径逐渐增大,培养后期有减小趋势,1岁时取材的睾丸组织曲细精管直径在培养前、培养4周、培养8周分别为(38.08±4.67) μm、(56.65±8.71) μm、(52.58±6.43) μm;2.9岁时取材的直径相应时间点分别为(38.40±2.33) μm、(56.81±7.71) μm、(54.15±5.44) μm;8.5岁时取材的直径相应时间点分别为(49.97±4.94) μm、(58.78±2.74) μm、(53.40±5.04) μm。1岁时取材的睾丸组织曲细精管横截面积在培养前、培养4周、培养8周分别为(1150.52±150.94) μm2、(2579.68±842.91) μm2、(2203.97±549.04) μm2;2.9岁时取材的横截面积相应时间点分别为(1162.30±143.57) μm2、(2581.21±700.53) μm2、(2326.26±468.48) μm2;8.5岁时取材的横截面积相应时间点分别为(1979.91±386.05) μm2、(2719.61±246.98) μm2、(2259.42±433.24) μm2。培养8周后曲细精管中观察到类初级精母细胞,Piwil2免疫组化染色提示生殖细胞具有更新分化能力。

结论

在体外培养条件下人未成熟睾丸组织中精原细胞可发育成精母细胞。培养8周生殖细胞仍然具有自我更新和分化能力,之后生殖细胞发育逐渐衰退。

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