【摘 要】
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目的:探讨过表达MTUS1/ATIPs对口腔恶性肿瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:应用RT-PCR检测舌鳞癌(TSCC)细胞UM1、腺样囊性癌组织(ACC)和唾液腺腺样囊性癌细胞(SACC-83)中MTUS1/ATIP表达水平及亚型分布.应用含ATIP1和ATIP3a片段的质粒转染口腔恶性肿瘤细胞UM1和SACC-83,48 h后以MTT检测细胞的增殖能力.采用流式细胞仪技术和细胞免疫荧光技术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western免疫印迹检测细胞中ATIP1、ATIP3a、ERK1/2、pERK1/2、C
【机 构】
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钦州市第一人民医院 口腔科,广西 钦州 535000;中山大学附属第一医院 口腔科,广东 广州 510080
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目的:探讨过表达MTUS1/ATIPs对口腔恶性肿瘤细胞增殖及凋亡的影响.方法:应用RT-PCR检测舌鳞癌(TSCC)细胞UM1、腺样囊性癌组织(ACC)和唾液腺腺样囊性癌细胞(SACC-83)中MTUS1/ATIP表达水平及亚型分布.应用含ATIP1和ATIP3a片段的质粒转染口腔恶性肿瘤细胞UM1和SACC-83,48 h后以MTT检测细胞的增殖能力.采用流式细胞仪技术和细胞免疫荧光技术检测细胞周期和细胞凋亡率,Western免疫印迹检测细胞中ATIP1、ATIP3a、ERK1/2、pERK1/2、Caspase3的表达水平.采用SPSS 19.0软件包对数据进行统计学处理.结果:RT-PCR结果显示,ATIP1、ATIP3a、ATIP3b是MTUS1的主要亚型,在口腔恶性肿瘤细胞(TSCC细胞系UM1、ACC组织和SACC-83细胞)中表达显著降低.转染MTUS1/ATIP1和MTUS1/ATIP3a后,舌鳞癌细胞的增殖能力受到显著抑制.转染ATIP1后,UM1细胞的抑制率分别为38.8％(24 h)和57.3％(48 h);转染ATIP3a后,UM1细胞的抑制率分别为48.1％(24 h)和56.5％(48 h);同时转染ATIP1和ATIP3a后,UM1细胞的抑制率分别为93.5％(24 h)和88.8％(48 h).同样,在SACC-83细胞中也出现类似效果(P<0.05).细胞周期分析发现,高表达MTUS1/ATIP1后,UM1及SACC-83细胞阻滞在G1/G0期;而ATIP3a则诱导细胞阻滞在G2/M期(P<0.05).Western免疫印迹检测显示,转染MTUS1/ATIP1和MTUS1/ATIP3a后,ERK表达升高,磷酸化ERK表达下降,Caspase 3表达升高.结论:MTUS1/ATIP是一个潜在的抑癌基因,可通过ERK途径,调控口腔恶性肿瘤细胞增殖并诱导细胞凋亡.
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