菌落PCR方法筛选低能离子束辐射引起的IS插入突变

来源 :安徽大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shushuclover1

【摘要】

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建立一种基于单拷贝基因的菌落PCR方法,筛选低能离子束辐射下IS因子插入引起的大肠杆菌lacI基因突变.PCR的优化结果显示,DMSO是一种合适的添加剂,而细胞的裂解方法和过程在菌

【作者】

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潘少杰汤明礼

【机构】

：

黄山风景区管理委员会园林局,中科院合肥物质研究院等离子体物理研究所

【出处】

：

安徽大学学报：自然科学版

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

：

菌落PCR 插入序列 lacI基因突变低能离子 colony PCR insertion sequence lacI mutation low-energy

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建立一种基于单拷贝基因的菌落PCR方法,筛选低能离子束辐射下IS因子插入引起的大肠杆菌lacI基因突变.PCR的优化结果显示,DMSO是一种合适的添加剂,而细胞的裂解方法和过程在菌落PCR中有比较关键的作用.经过测定,该方法的菌落PCR最低菌浓度约为1×10^5个菌.0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,96个突变子的菌落PCR的成功率为95%以上.测序结果表明：两个由IS因子插入引起的突变被成功筛选.

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