Sry基因的克隆及其在HeLa细胞中的表达

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目的:构建真核表达重组质粒pCR3.1-Sry,并检验其在真核细胞内的表达.方法:用PCR法从小鼠基因组中扩增出Sry全长基因,重组入pMD18-T载体,酶切鉴定重组质粒,对酶切正确的重组质粒测序.双酶切测序验证的重组质粒,将切下的片段与真核表达质粒pCR3.1相连构建pCR3.1-Sry重组质粒.将其转染HeLa细胞后,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA的转录;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白质的表达.结果:PCR法扩增得到了1.2 kb的特异性Sry基因片段;成功地构建了真核表达重组质粒pC
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