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目的
观察二氢杨梅素(DHM)对人膀胱癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。
方法用不同浓度(0、5、20 μmol/L)DHM处理UMUC3细胞,通过噻唑蓝(MTT)实验和流式细胞术检测DHM对细胞增殖的抑制作用,实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测DHM对周期蛋白(Cyclin D1和Cyclin E1)以及周期蛋白依赖性激酶(CDK2和CDK4)的影响。用SPSS 21.0软件进行统计分析,结果采用均值±标准差(Mean±SD)表示,统计方法为单因素方差分析,多组间两两比较采用最小显著性差异(LSD)法和邓肯(Duncan)多重范围检验。
结果DHM明显抑制UMUC3细胞增殖。与对照组[(48.4±0.6)%]比较,低浓度组[(55.2±0.1)%]和高浓度组[(60.5±0.3)%]G0/G1期细胞比例显著上升,差异有统计学意义(低浓度组F=417.668,P<0.01,高浓度组F=401.652,P<0.01)。高浓度组G0/G1期细胞比例大于低浓度组,差异有统计学意义(F=100.221,P<0.05)。RT-PCR和Western blot结果显示Cyclin D1、Cyclin E1、CDK2、CDK4表达均明显降低。
结论DHM可抑制人膀胱癌细胞增殖,可能与阻滞细胞周期由G0/G1期向S期过渡有关。