小鼠miR-125a超表达载体的构建

来源 :家畜生态学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Vivian496

【摘要】

：

为了探明miR-125a在精子发生中的功能,以小鼠基因组DNA为模板扩增miR-125a的前体片段（pre-miR-125a）,经过双酶切后连接入质粒pcDNA3.1（＋）,构建miR-125a超表达载体（pcDNA3.1（＋）-miR-125

【作者】

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宋峰峰张恺阳安俊辉覃金洲田秀娥曾文先

【机构】

：

西北农林科技大学动物科技学院

【出处】

：

家畜生态学报

【发表日期】

：

2018年4期

【关键词】

：

小鼠雄性生殖细胞 miR-125a qRT-PCR 载体

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(31072029,31272439)

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为了探明miR-125a在精子发生中的功能,以小鼠基因组DNA为模板扩增miR-125a的前体片段（pre-miR-125a）,经过双酶切后连接入质粒pcDNA3.1（＋）,构建miR-125a超表达载体（pcDNA3.1（＋）-miR-125a）;将pcDNA3.1（＋）-miR-125a转染至GC-1spg细胞系,通过qRT-PCR和Western Blot验证其超表达效果。结果表明：PCR扩增得到约290bp的miR-125a前体片段,成功构建了pcDNA3.1（＋）-miR-125a过表达载体,在

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