【摘 要】
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目的 观察激素性股骨头坏死(ONFH)患者间充质干细胞(MSCs)的数目、功能和成脂成骨分化能力是否改变,并探讨氧化应激在分化过程中的作用.方法 选取就诊32例激素性ONFH患者,21
【机 构】
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河南省人民医院骨科,郑州,450003
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目的 观察激素性股骨头坏死(ONFH)患者间充质干细胞(MSCs)的数目、功能和成脂成骨分化能力是否改变,并探讨氧化应激在分化过程中的作用.方法 选取就诊32例激素性ONFH患者,21例外伤性股骨颈骨折患者.在手术室无菌条件下抽取患者股骨骨髓10 ml.体外分离、培养MSCs,取第3代细胞进行实验.用10 μmol/L谷胱甘肽对ONFH组MSCs进行干预,比较各组MSCs的集落形成能力,检测细胞内活性氧水平、细胞成骨和成脂分化能力以及关键因子的表达水平.结果 与骨折组比较,骨坏死组MSCs集落形成能力下降,细胞内活性氧水平升高.骨坏死组MSCs成骨分化后茜素红染色阳性率为(46.70 ±4.21)％较骨折组[(79.20±6.48)％]明显降低,谷胱甘肽干预[(61.20±5.92)％]后升高;骨坏死组MSCs成脂分化后油红O染色吸光度(A)值(0.641 ±0.042)较骨折组(0.371±0.038)明显升高,谷胱甘肽干预(0.4918 ±0.031)后降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Runt相关基因2(Runx2)、碱性磷酸酶(ALP) mRNA的表达水平,与对照组比较(0.84 ±0.14、0.91 ±0.12),骨坏死组(0.27 ±0.12、0.18 ±0.07)显著降低,谷胱甘肽干预组分别为0.70 ±0.13、0.56±0.10.骨坏死组过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)、CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)的表达水平为0.74 ±0.11、0.85 ±0.12,对照组为0.31 ±0.08、0.34 ±0.07,谷胱甘肽干预组为0.45±0.09、0.48±0.10,差异有统计学意义(P＜0.05),各组相应基因的蛋白的表达水平与mRNA的表达趋势一致.结论 激素性ONFH患者MSCs数量和功能下降,细胞内活性氧水平升高,成骨能力下降,成脂能力增强.谷胱甘肽可以通过降低细胞内活性氧的水平逆转这种变化.
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