白蜡虫far3基因cDNA全长克隆、原核表达和酶活分析

来源 :四川动物 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huangxiaojuan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
脂酰辅酶A还原酶(FAR)可将脂酰辅酶A还原为相应的脂肪醇,在白蜡生物合成中起至关重要的作用。本研究通过c DNA末端快速扩增技术获得白蜡虫Ericerus pela far3基因cDNA全长,其开放阅读框(ORF)1 566 bp。对白蜡虫FAR3编码蛋白进行系统发育分析,发现FAR3与人类Human sapiens、小鼠Mus musculus、果蝇Drosophila melanogaster等物种的FAR聚为一支;成功构建pET-30a eGFP/EpelFAR3原核表达质粒,转入BL21感受态细胞,在浓度为0.05 mmol·L-1的异丙基硫代半乳糖苷诱导6 h后有较高的蛋白表达量;经Western blot验证,表达蛋白分子量与预估蛋白分子量符合;质谱分析蛋白质分值为3 900,蛋白覆盖度74%,所得肽段与理论序列相符;利用底物C24脂酰辅酶A、C26脂酰辅酶A、C28脂酰辅酶A和C30脂酰辅酶A对原核表达蛋白进行活性分析,利用气相色谱进行蛋白活性验证,没有理论产物相应脂肪醇的生成。本研究中白蜡虫far3 cDNA ORF的获得及原核表达的实现,为进一步的功能和组织表达定位研究奠定了基础。
其他文献
2007年底,太阳神(集团)率先提出"小康直销"理念。太阳神高层认为,公司之所以提出小康直销,就是希望通过实实在在的直销,建立理性、务实、长久的健康财富观。太阳神对小康直销
<正>1886年,美国纽约一位图书推销员大卫·麦克尼(David Mcconnell)在推销过程中目睹了这样一种奇特的现象——随图书赠送的礼品香水深受读者青睐。他灵机一动,开办了一家专
<正>1.安利中国直销的标志上榜理由:百度搜索"安利",共有7,910,000条结果。行业有个笑话是:如果你没有受到过安利人的"骚扰",那么你要赶紧去医院,因为你可能患有自闭症。笑话
<正>华人企业崛起以20年的角度来审视,华人企业在中国直销业的发展要远比美资企业走得曲折。从90年代初的分庭抗礼到1998年前后政策高压下的苟延残喘,再到立法前后的备受压制
目的应用静脉留置针直接动脉端顺行穿刺的方法行自体动静脉内瘘血管造影,评估血透患者的血管通路狭窄情况,为临床手术重建内瘘功能或经皮腔内血管成形术(PTA)提供正确的术前
目的总结特发性肺间质纤维化(IPF)的影像表现及动态变化,重点关注蜂窝影与磨玻璃密度影的表现及变化,并与病理结果对照。方法回顾性分析41例特发性肺间质纤维化(IPF)的HRCT表
<正> 作者从1980年起,用清热解毒、祛风利湿的民间验方治疗婴儿湿疹80例,效果较好,尤其是6~24个月的患儿,疗效更佳。药物组成:半边莲、乌韭、白英各15克,金银花
期刊
研究了两转子相互错开180°的双转子空调压缩机.以热力学基本方程及马丁-侯方程为依据,顾及双转子与单转子不同的特点,并考虑了工质和润滑剂的泄漏、气缸壁和转子间的热交换、气阀的
<正>尽管离直销立法已经过去了5年,但各地执法部门对于直销的认定却存在着较大的差异,这种差异直接表现在执法中。国内某些地域的工商、公安,对于直销的认定与处罚异常苛刻,
通过对林分平均胸径100倍圆法理论含义的分析,推导出方形样地(或标准地)的边长等于林分平均胸径的88.62倍时,林分每公顷断面积等于方形样地内的林木株数加上边界上林木株数的一半