金黄色葡萄球菌sigB基因同源重组质粒构建的研究

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目的:构建金黄色葡萄球菌sigB基因的同源重组质粒,为进一步研究其生物膜的形成机制奠定基础。方法:将“sigB上游序列-卡拉霉素抗性基因-sigB下游序列”目的片断以金黄色葡萄球菌X387基因组DNA和pEGFP—N2质粒分别进行PCR扩增,其中3个片段互连的末端以其本身的序列互补,两端分别携带EcoRⅠ、XhoⅠ酶切位点,并采用融合PCR法进行片段连接;按pBluescript ⅡSK(+)质粒说明书构建含连接片断的质粒,分则将重组pBluescript ⅡSK(+)质粒和载体质粒pGEM-7zf(+)
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