巨型艾美耳球虫ADF基因的克隆及原核表达

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gzalpha
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[目的]克隆巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)的ADF基因,并进行原核表达.[方法]采用RT-PCR方法扩增ADF基因,并将其与原核表达载体pET-28a连接,构建原核表达载体pET-28a-ADF,转化人大肠埃希菌Rossata (DE3)中,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.[结果]重组原核表达质粒经双酶切及测序鉴定结果正确.表达分子质量单位为17 ku的融合蛋白.Western blot检测融合蛋白能被抗E.maxima多克隆抗体识别.[结论]构建的原核表达载体pET-28a-ADF能表达具有反应原性的蛋白,为其免疫原性研究奠定了基础.
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