【摘 要】
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目的 研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1表达是否通过靶向调控微小RNA-423-5p(miR-423-5p)影响直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测直肠癌组织和细胞中lncRNA DBH-AS1和miR-423-5p表达.构建干扰lncRNA DBH-AS1表达的SW1463细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达,T
【机 构】
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郑州大学附属郑州中心医院消化内科,河南 郑州 450000
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目的 研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1表达是否通过靶向调控微小RNA-423-5p(miR-423-5p)影响直肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭.方法 实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测直肠癌组织和细胞中lncRNA DBH-AS1和miR-423-5p表达.构建干扰lncRNA DBH-AS1表达的SW1463细胞,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Western印迹检测细胞周期蛋白(Cyclin)D1、p21、p27、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达,Transwell小室法检测细胞迁移侵袭.SW1463细胞中转染miR-423-5p,观察其对细胞增殖、迁移、侵袭的影响.生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析DBH-AS1和miR-423-5p的靶向关系.共转染si-DBH-AS1和anti-miR-423-5p,评估抑制miR-423-5p表达对干扰lncRNA DBH-AS1表达诱导的SW1463细胞增殖、迁移、侵袭的作用.结果 与癌旁组织或NCM460细胞比较,直肠癌组织或细胞SW1463、Caco-2、SW480中DBH-AS1表达量显著增加,miR-423-5p表达量显著减少(均P<0.05).干扰lncRNA DBH-AS1表显著降低SW1463细胞48 h、72 h的细胞活性、CyclinD1蛋白表达、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达(均P<0.05),显著提高p21、p27蛋白水平(均P<0.05).miR-423-5p过表达显著抑制SW1463细胞48 h、72 h的细胞活性、迁移细胞数、侵袭细胞数、CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达(均P<0.05),而提高p21蛋白水平(P<0.05).DBH-AS1靶向调控miR-423-5p的表达.抑制miR-423-5p表达逆转了干扰lncRNA DBH-AS1表达对SW1463细胞增殖、迁移、侵袭的抑制作用.结论 干扰lncRNA DBH-AS1表达可通过靶向调控miR-423-5p表达,从而抑制直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭.
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