【摘 要】
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以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列( GeneBank AY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠
【机 构】
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大连民族学院生命科学学院,生物技术与资源利用国家民委一教育部重点实验室,辽宁大连116600
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以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列( GeneBank AY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒EC-BS8上,构建成表达质粒EC-BS8,再将其转化到枯草芽孢杆菌Bs6中.筛选表达菌株,实现了豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中高效表达.获得重组菌纤溶酶活力高达9 830 IU· mL-1,是出发菌株活力的2.9倍.经纯化SDS-PAGE鉴定重组豆豉纤溶酶相对分子质量为31.0 kDa.
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