[目的] 研究双孢蘑菇W192液体菌种摇瓶培养菌丝体生长规律,为液体种子活力判断提供参考.[方法] 采用液体摇瓶培养,分别测定了液体培养过程中双孢蘑菇菌丝体生物量、菌丝球数量和直径、发酵液pH值、还原糖和氨基氮含量、羧甲基纤维素酶、淀粉酶、酸性蛋白酶、漆酶胞外酶活性生理生化指标.[结果] 摇瓶培养第8 d时,双孢蘑菇菌丝体生物量最大,为9.7 mg·mL-1;菌丝球数量最多,为880个·mL-1;菌丝体平均直径最大,为0.809 mm;培养液中还原糖、氨基氮含量最高,分别为5.228、0.079 mg·mL-1;羧甲基纤维素酶、淀粉酶、漆酶酶活性最高,分别为0.69 、2.11 、15.02 U.摇瓶培养第10 d时,酸性蛋白酶活性最高,酶活性为2.93 U.将摇瓶培养8 d的液体种子转接液体培养基中进行模拟发酵罐液体菌种培养,获得的菌丝球数量最多,达115个·mL-1,菌丝体生物量最大,达7.56 mg·mL-1.[结论] 双孢蘑菇液体菌种活性与上述指标具有一定的相关性,结合液体种子活力验证,判断第8 d的液体菌种活力最高,可作为液体种子用于发酵罐扩繁培养.