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目的获得大量具有良好的IgE结合活性的Der f Ⅱ重组变应原,以促进粉尘螨变态反应性疾病的特异性诊断及治疗的研究。方法挑取经纯培养的粉尘螨,提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Der f Ⅱ片段,产物连接进入T载体(pMD18)。经扩增后,用Nde Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后将目的片段连接到pET-24a表达载体上,得到重组质粒pET-Der f2,工程菌经IPTG诱导培养,明显表达出Der f Ⅱ蛋白,表达产物经固定化金属配体亲和层析纯化,用Western blot检测免疫学活性。结果成功提取粉尘螨的