【摘 要】
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目的 探讨LINC 01118 对人卵巢癌细胞紫杉醇耐药的影响,并研究其调控机制.方法 利用RT-qPCR测定两组卵巢癌紫杉醇耐药细胞系及亲本细胞系中LINC 01118的表达水平;利用Lipofec
【机 构】
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首都医科大学附属北京潞河医院妇产科, 北京,101100
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目的 探讨LINC 01118 对人卵巢癌细胞紫杉醇耐药的影响,并研究其调控机制.方法 利用RT-qPCR测定两组卵巢癌紫杉醇耐药细胞系及亲本细胞系中LINC 01118的表达水平;利用Lipofectamine TM 2000将siRNA-LINC 01118、siRNA-LINC 01118+GV 230-vim以及相关对照转染至卵巢癌紫杉醇耐药细胞SKOV 3-TR 30中,RT-qPCR验证siRNA对LINC 01118的靶向沉默效率;利用MTT法测定转染后SKOV 3-TR 30细胞对紫杉醇的敏感性;利用流式细胞仪测定转染后SKOV 3-TR 30细胞的凋亡率;利用免疫印迹实验(Western blot)测定转染后vimentin蛋白,耐药蛋白MRP 1、MDR 1 及ABCG 2的表达水平.结果 RT-qPCR实验结果 显示,LINC 01118 在卵巢癌紫杉醇耐药细胞中的表达水平显著高于其亲本细胞(P＜0.05);转染siRNA-LINC 01118可明显抑制SKOV 3-TR 30细胞中LINC 01118的表达(P＜0.05);MTT实验结果 显示,抑制LINC 01118的表达显著增加了SKOV 3-TR 30 细胞对紫杉醇的敏感性(P＜0.05),过表达vimentin 能逆转抑制 LINC 01118 表达时卵巢癌耐药细胞对紫杉醇的敏感性增加现象(P＜0.05);流式细胞术结果 显示,抑制LINC 01118 表达显著增加了SKOV 3-TR 30 细胞的凋亡率(P＜0.05);Western-blot实验结果 显示,抑制LINC 01118表达后,vimentin蛋白的表达水平明显降低(P＜0.05),耐药蛋白MRP 1、MDR 1 及ABCG 2的表达均显著减少(P＜0.05).结论 LINC 01118 在卵巢癌紫杉醇耐药细胞中异常高表达;抑制 LINC 01118表达可以逆转卵巢癌细胞紫杉醇耐药,诱导细胞凋亡;LINC 01118 可以通过正向调控 vimentin蛋白 影响卵巢癌细胞紫杉醇耐药.
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