【摘 要】
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本试验以药用植物金花葵为研究材料,对金花葵ISSR反应体系进行优化。结果表明,最优体系为d NTP浓度为0.10 mmol/L、Taq酶浓度为0.25 U、引物浓度为0.20 mmol/L、Mg2+浓度为0.
【机 构】
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内蒙古民族大学农学院,内蒙古蒙药工程技术研究院,通辽国家农业科技园区发展服务中心
【基金项目】
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自治区本科直属高校2019年“双一流”建设项目30种蒙(中)药材生物学特性及评价研究,2016年内蒙古蒙医药科技重大专项子课题“内蒙古民族大学农业科技园区蒙药材种植基地建设”
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本试验以药用植物金花葵为研究材料,对金花葵ISSR反应体系进行优化。结果表明,最优体系为d NTP浓度为0.10 mmol/L、Taq酶浓度为0.25 U、引物浓度为0.20 mmol/L、Mg2+浓度为0.40 mmol/L、DNA浓度为50 ng;反应步骤为:94℃预变性5 min,94℃变性45 s,55℃退火55 s,72℃延伸1 min,40次循环,72℃最后延伸10 min,4℃条件下保存。本试验建立的金花葵ISSR反应体系具有稳定性好、清晰度高、多态性丰富等优点,可为今后金花葵遗传多样性研究
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