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目的：构建全基因HBV真核细胞表达载体，并对其在细胞内的复制、转录、翻译进行研究。方法：采用分子亚克隆技术，将长约3.2Kb的HBV全基因克隆到真核细胞表达载体pBK-CMV的EcoRI位点，构建的pKB-HBV经FUGENETM6导入人肝癌细胞系SMMC-7721细胞中。结果：经PCR、RT-PCR验证pBK-HBV能够在SMMC-7721细胞中有效复制和转录。固相放免法显示HBV转染细胞内的HBsAg、HBeAg的合成和分泌。免疫组化法证明，胞内浆型分布为主的HBcAg的表达。结论：HBV全基因真核细