【摘 要】
：
为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响.结果表明,PEI
【机 构】
：
扬州大学动物科学与技术学院,美国密苏里大学动物科学系
【基金项目】
：
国家转基因生物新品种培育重大专项;
论文部分内容阅读
为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响.结果表明,PEI和TransFast转染剂能极显著提高猪精子转染效果,且PEI优于TransFast,而NanoFect转染剂包裹DNA不能转染精子.随着转染温度的升高,精子的活力和活率均明显下降,而转染率和内化外源DNA量基本保持稳定,而吸附外源DNA量呈下降趋势.环状DNA和线性化DNA在与精子共孵育后,两者的精子活力、活率、转染率和内化外源DNA量差异均不显著,精子吸附线性化DNA量极显著高于环状DNA量.综合分析表明,外源DNA形态对猪精子转染效果无显著影响；PEI和TransFast能够显著提高猪精子转染效果；共孵育温度以17℃为最佳,本结果为开展精子载体法制备转基因猪研究提供了基础试验依据.
其他文献
目的 通过对比朝阳区紧急医疗救援绩效管理实施前后各救援分中心工作数量、工作质量情况的改变,分析产生这些改变的原因,为绩效管理进一步完善提供依据.方法 运用x2分析绩效
目的 分析目前社区级急救资源状况.方法 在朝阳区内的36个社区急救站采用问卷式调查.结果 调查显示:区内急救站的平均面积为57 m2;共有40台救护车,但36％的救护车内的无线通讯
目的:研制组合式床旁X线拍片盒扶持装置,用于水平侧位X线床旁拍片的片盒摆放,避免工作人员或陪护人员扶持拍片盒遭受X线辐射。方法:采用无紧固件的磁性连接方式,分为底座、连
目的:基于Xsight脊柱追踪系统对胸椎转移瘤治疗前摆位及治疗中体位稳定性进行定量分析,以期为临床应用提供参考。方法:选择10例行射波刀(Cyber Knife,CK)治疗的胸椎转移瘤患
本文就地震灾害对油气长输管道产生的负面影响展开探讨,并就抗震问题、研究应对策略进行了探析,对促进油气管道长输的高效运行、持续服务有重要的实践意义.
前列腺增生(benign prostate hyperplasia,BPH)是老年男性常见的下尿路梗阻疾病,其发病机制目前尚未完全阐明,可能与多种因素有关[1].但多数学者认为,前列腺增生的发生、发展
目的 通过对望京地区患者及陪同者进行心肺复苏知识的调查,了解他们对猝死患者的现场急救水平及技能的需求程度,为提高院前急救能力提供依据.方法 采用自编问卷的方式,对在望
目的 了解城市突发事件的基本特点,对城市紧急医疗救援体系建设提出建议.方法 对2012～2014年北京市朝阳区563件突发公共事件紧急医疗救援工作实践进行回顾性研究.结果 突发事
本文围绕“互联网+”模式下院外医疗急救事业的实践和展望进行阐述.利用云计算、大数据、物联网、移动互联网等技术手段,推动互联网技术与急救全过程的深度融合.提高指挥调度
目的 应用模拟人评价院外急救医务人员心肺复苏技术水平.方法 应用模拟人对132名院外急救医务人员心肺复苏技术水平,包括按压深度、按压正确率、按压过浅、手部位置错误、按