【摘 要】
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目的 建立靶向miR-374b的MIA3 psicheck2野生型及突变型载体,为双荧光素酶报告实验提供前期保障. 方法 构建MIA3 psicheck2野生型及突变型载体,首先根据小鼠MIA3-3 'UTR序列信息设计其扩增引物,以小鼠血液全血基因组DNA为模板PCR扩增MIA3-3 'UTR序列,并将其克隆至psicheck2双荧光素酶报告载体中.然后,设计突变引物将miR-374b种子序列靶
【机 构】
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目的 建立靶向miR-374b的MIA3 psicheck2野生型及突变型载体,为双荧光素酶报告实验提供前期保障. 方法 构建MIA3 psicheck2野生型及突变型载体,首先根据小鼠MIA3-3 'UTR序列信息设计其扩增引物,以小鼠血液全血基因组DNA为模板PCR扩增MIA3-3 'UTR序列,并将其克隆至psicheck2双荧光素酶报告载体中.然后,设计突变引物将miR-374b种子序列靶标TATTATA突变成AAATTAT构建突变载体.其次,采用载体酶切鉴定及测序法对构建的载体进行鉴定. 结果 琼脂糖电泳分析,载体PCR扩增大小与理论大小相符合.DNA测序鉴定MIA3-3 'UTR-WT载体构建成功.突变型载体的构建,成功将miR-374b种子序列靶标TATTATA突变成AAATTAT. 结论 载体的成功构建,为进一步鉴定miR-374b与成软骨分化相关靶基因MIA3是否真正具有结合位点奠定了基础。
其他文献
随着社会经济发展,工业意外大大增加,手创伤的患者占工伤的比例也不少.中国显微外科手术自20世纪60年代起发展,现在已相当成熟,不少手术都是世界首创的.很多严重手创伤导致的组织损伤都可被修复,且手术近乎完美,单从《中华显微外科杂志》2013年报道的就有数十篇[1-14].但完整详细介绍术后皮瓣康复和促进功能恢复的典型文献不多.其实单是手术的成功,而没有康复的配合,结果还是失败,因为患者的手功能未能恢
骶尾部褥疮的临床治疗较为棘手,以通常的植皮、换药方法难以治愈.目前多采用扩创和皮瓣转移术,但术后皮瓣下感染和创口裂开发生率均较高.自1997年5月至2010年12月,我院共收治骶尾部褥疮患者25例,术后13例出现皮瓣下感染和创口裂开,经扩创处理后愈合.资料与方法本组25例,男17例,女8例.年龄25～65岁,平均42.4岁,均为腰以下截瘫患者.褥疮形成时间4个月～7年,平均1.4年.褥疮部位均位于
目的 探讨应用VSD联合带蒂皮瓣或游离皮瓣在修复腕手部软组织缺损的临床意义.方法 2009年1月至2012年12月,应用VSD联合带蒂皮瓣(包括骨间后逆行岛状皮瓣、鼻烟窝逆行岛状皮瓣、尺动脉腕上支皮瓣)和游离皮瓣(包括游离股前外侧皮瓣和游离腓动脉穿支皮瓣)对85例腕手部皮肤软组织缺损创面进行修复,对其临床资料和治疗效果进行回顾性分析.结果 6例游离皮瓣出现动脉栓塞危象,经再次血管探查后,皮瓣成活良
2011年5月至2012年9月,我科对手指中、末节皮肤缺损的患者采用改良掌背动脉筋膜蒂皮瓣修复15例,并行3～9个月随访,效果满意,现报道如下.资料与方法本组共15例15指,男11例,女4例;年龄19 ～ 53岁.碾压伤10例,切割伤2例,组织块再植坏死1例,热压伤2例;手指缺损面积为5.0cm×2.0cm～6.0m×3.0cm,创面均伴有指骨、肌腱外露,皮瓣供区直接拉拢缝合.皮瓣旋转轴点为近节指
目的 总结应用指背链型血供岛状皮瓣修复手指皮肤缺损的临床效果. 方法 以手指桡背侧缘或尺背侧缘为轴线设计皮瓣,皮瓣的旋转点在轴线上离创面1.0～1.3 cm处,蒂长度不超过1.3 cm,选择皮瓣切取面积1.0 cm×1.0 cm～2.0 cm ×3.0 cm,蒂部带少许水滴状皮肤,经明道转移至创面进行修复25例.结果 25例皮瓣术后24例顺利成活,1例远端皮缘小部分坏死,经换药后愈合.术后随访3个
目的 探讨X-tube与椎间盘镜下腰椎间盘切除术治疗单节段腰椎间盘突出症的临床疗效.方法 回顾性分析自2009年1月至2012年12月共收治86例腰椎间盘突出患者,经X-tube行髓核摘除手术46例,经椎间盘镜下腰椎间盘切除40人.按Nakai评分标准评价临床效果,同时记录手术切口长度、手术时间、失血量、并发症、住院天数及术后恢复情况.记录术前、后疼痛视觉模拟评分,术前、术后末次随访时OS-WES
目的 观察皮瓣转移修复臀骶部褥疮的临床疗效. 方法 2009年1月至2013年6月,收治褥疮患者20例26处,年龄32～ 88岁.创面范围5cm×3 cm～22cm×13cm.根据患者年龄、褥疮部位、范围及深度等选择皮瓣类型,应用臀大肌上部皮瓣旋转修复骶尾部褥疮8处,臀大肌下部皮瓣旋转修复坐骨结节部褥疮1处,全臀大肌皮瓣旋转修复骶尾部、大粗隆部褥疮10处,双侧臀大肌V-Y推进肌皮瓣修复骶尾部褥疮5
患儿男,生后0.5h,体重3.32 kg.因2013年3月9日上午10时许在某医院剖宫产过程中剪脐带误伤其左手小指,致左手小指远指间关节处完全离断半小时,急诊请我院手显微外科会诊.检查:发育正常,哭声宏亮,心跳呼吸正常,四肢无畸形.左手小指远指间关节间隙平面完全断离,两断面整齐,关节面外露,离体指完整苍白,近断端有活跃出血(图1、2)。
目的 评价连续正中神经阻滞在多条屈指肌腱吻合术后镇痛及早期康复训练中的作用. 方法 2006年1月至2013年8月,收治多条屈指肌腱断裂吻合术患者84例,根据入院顺序随机分为两组:神经阻滞组42例术后连续正中神经阻滞镇痛,静脉镇痛组42例术后静脉自控镇痛.比较两组术后不同时间点VAS疼痛评分、不良反应发生率、术后肌腱功能评价、高频超声肌腱组织学评价. 结果 神经阻滞组患者术后6、12、24、48、
患者男,31岁,刀砍伤左耳6h急诊入院.入院诊断:左耳郭上2/3完全离断.专科情况:左耳从耳郭前上缘沿三角窝向后下沿对耳轮达对耳屏平面完全离断,断缘整齐,远端污染严重,离断耳体完整(图1);近端耳软骨外露伴有活动性出血,外耳道积血.手术经过:入院后行术前准备,断耳以大量无菌盐水、3％双氧水反复交替冲洗,清除污染物,碘伏消毒,16倍手术显微镜下标记离体左耳,分别标记耳背动脉1条,耳背静脉1条,耳前静