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观察低表达人血细胞特异蛋白1相关蛋白X1(HAX1)对结肠癌细胞增殖的影响。
方法利用HAX1特异性低表达小干扰RNA(siHAX1)瞬时转染结肠癌细胞SW48,通过Western blot验证低表达成功,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验观察HAX1对SW48细胞的影响,利用Western blot检测细胞周期蛋白(Cyclin) D1表达。
结果Western blot证实在结肠癌细胞中低表达HAX1模型的成功建立,CCK-8实验结果表明,对照组(siCon)48 h结肠癌细胞吸光度(A)值(1.264±0.020)较各实验组(siHAX1)A值(1.122±0.057、1.021±0.033、0.989±0.049)差异有统计学意义(P<0.05),即实验组增殖能力降低。72 h时,对照组A值(1.332±0.019),各实验组A值(1.199±0.040、1.081±0.022、1.068±0.026),组间比较差异有统计学意义(P<0.05),说明72 h时实验组增殖能力仍降低。克隆形成实验显示,对照组(siCon)克隆形成数目[(713±40)个]明显多于各实验组克隆形成数目[(422±33)、(558±37)、(505±23)个],且差异有统计学意义(P<0.05),说明实验组克隆形成能力降低。Western blot证实在细胞低表达HAX1蛋白后,可明显降低Cyclin D1蛋白的表达。
结论在结肠癌细胞中,低表达HAX1可通过抑制Cyclin D1的表达抑制肿瘤细胞增殖。