【摘 要】
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应用PCR扩增得到猪2型圆环病毒ORF2基因的3′端约600bp,该PCV2 ORF2基因已去除终止子,并分别在其上下游添加Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点.PCR产物用KpnⅠ和HindⅢ酶切后,与经同样
【基金项目】
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陕西省农业攻关项目（2003K02-G10）
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应用PCR扩增得到猪2型圆环病毒ORF2基因的3′端约600bp,该PCV2 ORF2基因已去除终止子,并分别在其上下游添加Kpn Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点.PCR产物用KpnⅠ和HindⅢ酶切后,与经同样处理过的pBAD/g ⅢB Vector连接,转化TOP10细胞后挑取阳性克隆,经酶切鉴定和测序验证后用L-arabinose诱导进行融合表达,表达的蛋白主要以包涵体存在.经过镍离子亲和层析柱纯化,SDS-PAGE显示1条约28 ku的目的条带,纯度达到85%以上.以该28 ku的多肽包被酶标板,建立了
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