【摘 要】
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目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝细胞的分布特点及蛋白表达的规律.方法常规分子克隆技术构建HBx及其各种突变体的表达载体; Western blot验证HBx蛋白的表达;荧光共聚集扫
【机 构】
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北京,军事医学科学院放射医学研究所
【基金项目】
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国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金;中国博士后科学基金
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目的探讨乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)在肝细胞的分布特点及蛋白表达的规律.方法常规分子克隆技术构建HBx及其各种突变体的表达载体; Western blot验证HBx蛋白的表达;荧光共聚集扫描技术观察HBx蛋白在肝细胞中的分布特点;谷光甘肽S转移酶(GST)-Sepharose 4B亲和层析方法纯化GST-HBx融合蛋白.结果成功构建了全长HBx及其各种缺失突变体表达载体;HBx蛋白在肝细胞核内均匀分布,在细胞质内呈颗粒状聚集分布;在优化蛋白表达及纯化条件下,突变体HBx(73～120 aa)的GST融合蛋白极易降解.结论为从蛋白水平探讨HBx的生物学功能提供了有利的材料.
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