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【摘 要】目的：构建SH3结构域结合蛋白4(SH3-domain binding protein 4, SH3BP4)重组腺病毒载体及shSH3BP4慢病毒载体，初步探索SH3BP4对肝癌细胞迁移增殖能力的影响。方法：PCR扩增SH3BP4 cDNA序列并构建腺病毒重组质粒pAdEasy-SH3BP4，HEK293细胞包装重组腺病毒AdSH3BP4；构建SH3BP4基因短发夹型RNA干扰慢病毒载体，转染至HEK293T细胞，包装重组慢病毒shSH3BP4。采用Western blot检测SH3BP4在人正常肝脏细胞及肝癌细胞的内源性表达，将SH3BP4过表达实验部分设为3个组：Mock组、AdGFP组和AdSH3BP4组，Mock组为空白对照组，AdGFP组为感染腺病毒AdGFP的对照组，AdSH3BP4组为感染腺病毒AdSH3BP4的实验组；将SH3BP4敲低实验部分设为2个组：shControl组和shSH3BP4组，shControl组为感染慢病毒shPLL3.7的对照组，shSH3BP4组为感染慢病毒shSH3BP4的实验组。通过Transwell和划痕实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞迁移能力的影响；MTS和直接克隆形成实验检测SH3BP4过表达和敲低对肝癌细胞的增殖能力的影响。结果：经限制性内切酶酶切及DNA测序验证，成功构建AdSH3BP4重组腺病毒载体和shSH3BP4慢病毒载体。Transwell结果表明，AdSH3BP4组(74.800±0.544)相较于空白对照组(219.467±2.640)与AdGFP组(210.533±8.498)，迁移的细胞数明显减少(P＜0.000)；而shSH3BP4组(191.467±3.906))比shControl组(91.733±2.763)细胞的迁移数目明显增加(P＜0.000)。划痕实验结果表明，AdSH3BP4组的细胞修复率[(10.400±0.036)%]明显低于空白对照组[(37.5000±0.0625)%]与AdGFP组[(50.0000±0.0625)%](P＜0.000)；而shSH3BP4组[(55.00±0.05)%]明显高于shControl组[(23.3±0.029)%](P=0.000)。MTS结果表明：AdSH3BP4组在96 h的吸光度值(0.921±0.053)与空白对照组(1.091±0.043)及AdGFP组(1.062±0.024)相比明显降低(P=0.005)。shSH3BP4组在96 h的吸光度值(1.497±0.020)与shControl对照组(1.142±0.103)相比明显升高(P=0.004)。直接克隆形成实验结果表明，AdSH3BP4组的细胞克隆形成数(34.333±2.082)相较于空白对照组(86.333±4.726)与AdGFP组(87.333±1.528)明显减少(P＜0.000)，而shSH3BP4组(65.000±6.557)却明显高于shControl组(31.000±2.000)(P=0.001)。上述实验结果说明SH3BP4过表达能显著抑制肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力，而SH3BP4敲低能明显促进肝癌细胞的迁移、侵袭和增殖能力。结论：SH3BP4可抑制肝癌细胞迁移、侵袭和增殖，可能为肝癌的诊治提供一个新的靶标。