【摘 要】
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以扁玉螺基因组DNA为材料,分析了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物以及模板DNA浓度对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立了一套适合扁玉螺的ISSR-PCR反应体系。该反应体系包括:2.0mm
【机 构】
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鲁东大学生命科学学院,烟台经济技术开发区第八小学 山东烟台,264025,山东烟台264006
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以扁玉螺基因组DNA为材料,分析了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶、引物以及模板DNA浓度对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立了一套适合扁玉螺的ISSR-PCR反应体系。该反应体系包括:2.0mmol/L的Mg2+,0.25mmol/L的dNTP,0.8U的TaqDNA聚合酶,0.2μmol/L的ISSR引物和40ng模板DNA。利用优化后的反应体系,从30条ISSR引物中筛选出了13条扩增效果较好的引物,这为进一步利用ISSR标记研究扁玉螺的遗传多样性打下了基础。
The effects of Mg2 +, dNTP, Taq DNA polymerase, primers and template DNA concentration on the amplification of ISSR-PCR were analyzed using genomic DNA of Bifidus asiaticus. An ISSR-PCR reaction system suitable for Bifidus was established. The reaction system included 2.0 mmol / L Mg2 +, 0.25 mmol / L dNTP, 0.8 U Taq DNA polymerase, 0.2 mol / L ISSR primer and 40 ng template DNA. Using the optimized reaction system, 13 primers with good amplification results were screened out from 30 ISSR primers, which lays the foundation for the further study on the genetic diversity of Blow snails using ISSR markers.
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