【摘 要】
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目的:研究内源性甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)对于体外诱导培养破骨细胞的影响.方法:取8周龄PTH+/+和PTH-/-小鼠各16只,分离培养小鼠股骨全骨髓细胞,在含有10 ng/m
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院骨科,江苏南京210029
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目的:研究内源性甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)对于体外诱导培养破骨细胞的影响.方法:取8周龄PTH+/+和PTH-/-小鼠各16只,分离培养小鼠股骨全骨髓细胞,在含有10 ng/ml巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的培养皿中培养24 h,收集未贴壁细胞,即得破骨细胞前体,利用M-CSF和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)刺激形成破骨细胞.根据加入不同RANKL浓度分为低浓度(50 ng/ml)和高浓度(100 ng/ml)组.于诱导第6天、第9天进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,观察破骨细胞形态并计数40或100倍视野内TRAP阳性细胞数量.结果:M-CSF和RANKL能够在体外诱导小鼠全骨髓细胞形成TRAP阳性的破骨细胞.诱导第9天进行TRAP染色,同一个视野中形成的TRAP阳性破骨细胞数量较诱导第6天减少,但是破骨细胞体积和细胞核数量增多.相同浓度RANKL刺激下,PTH+/+与PTH-/-组破骨细胞数量未见明显统计学差异.不同浓度RANKL刺激下,高浓度组破骨细胞数量明显多于低浓度组细胞数量.结论:内源性PTH对于体外M-CSF和RANKL诱导骨髓培养的破骨细胞数量没有影响,与低浓度组相比,高浓度RANKL能够进一步促进破骨细胞数量增加.
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