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摘要:目的:本实验动态测定高盐饮食致高血压大鼠不同时期脑干基底部和血浆 ET、CGRP含量的变化。方法:把4%NaCl液体500ml装在500ml水瓶子中,让2 月龄Wistar 大鼠每天自由饮用,共持续10周时间。即可形成高血压动物模型,该模型动物同时伴有心脏肥厚,血管壁中层增厚等血管重构现象。10周后宰杀大鼠,打开腹腔通过腹主动脉采取血液5ml置于冰箱内冷藏待遇[1]。然后开颅取出脑干,用放射免疫酶联法测试ET、CGRP含量。结果:2月龄大鼠经过10周高盐饮食后导致高血压,其脑干和血浆中的ET含量均明显高于同龄Wistar 鼠(WR)(P<0.01) ,而 CGRP含量均明显低于同龄WR( P<0.01)。而12月龄大鼠脑干和血浆中的ET含量均明显高于2月龄大鼠。结论:①高盐饮食可以导致高血压;②高水平的E T含量和较低的CGRP含量可能与高血压的形成和发展有关;③老龄化也是高血压一个不容忽视的原因。
关键词:ET CGRP 高血压 高盐饮食【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1008-1879(2012)12-0016-02
1 材料与方法
1.1 实验动物。2月龄Wistar大鼠( WR)100只,体重90~140g,12月龄Wistar大鼠( WR)50只,体重100~160g,购自西安交通大学医学院实验动物中心, 将2月龄Wistar大鼠( WR)随机分为2组,即:对照组50只,造模组50只,12月龄Wistar大鼠( WR)50只装在一个笼子内。3组大鼠分装在3个大的动物饲养笼中,在同一条件下,用颗粒型普通大鼠饲料喂养,饮用自来水,适应性喂养1周。
1.2 高盐饮食高血压动物模型建立。将3组大鼠同样喂养的基础上,给造模组50只WR每天加入4 %NaCl液体500ml, Wistar 大鼠每天自由饮用,共持续10周时间[3]。
1.3 样本收集及测定。10周实验结束后,将所有大鼠,用20%乌拉(0.6ml/100mg)胸腔内注射麻醉,打开胸腔在胸主动脉采血,采血量5ml/只,并立即移入离心管,迅速放入全自动高速冷冻離心机里,以3500r/min离心15min,取50μl上清液。同时迅速将取过血液的大鼠置于冰盘上断头分离脑干、称重,沸水浴10分钟,置玻璃匀浆器, 加入1 mol/ L 预冷的醋酸( w / v = 1∶5) 匀浆, 低温离心( 4500rpm×10min,4℃),取上清液置于聚丙乙烯塑料试管中加 PELH 液补充至 3ml,所取血液迅速置于含 10% EDTANa2501和1001抑肽酶试管中, 混匀低温离心( 4500rpm×10min, 4℃) , 取上清液置于聚丙乙烯塑料试管中,所有样本均置于-70℃低温冰箱中保存。样本收集齐后一次性用南京建成出品的ET 和CGRP 放免药盒进行测试,操作程序严格按各药盒说明进行。
1.4 统计处理。各组测定结果以表示, 用电子计算机进行各组均数和各组均数间差别显著性检验(P检验)。
2 结果
表1 各组大鼠脑ET、CGRP 的变化比较( n=50只)
组别ET(pg/mg)CGRP(pg/ml)对照组Ⅰ7.76±2.07**105.4±27.63对照组Ⅱ6.37±1.9498.37±27.69造模组16.07±2.35157.26±32.81**表2 各组大鼠血浆ET、CGRP 的变化比较(X±S,n=50只)
组别ET(pg/mg)CGRP(pg/ml)对照组Ⅰ7.76±2.07**157.26±32.81**对照组Ⅱ6.37±1.9441.02±27.50造模组1.91±5.18**395.43±40.003 讨论
本课题采用动物作为实验研究对象,研究高血压的病因及生化指标的变化,课题结果显示: 2月龄WR高盐饮食高血压WR脑干和血浆中 ET水平明显高于同龄正常血压WR的含量(P<0.01),而 12月龄的正常血压的WR脑干和血浆ET含量又明显高于2月龄的含量(P<0.01)。2月龄高盐饮食高血压WR脑干和血浆 CGRP 含量低于2月龄和12月龄WR的含量,并随鼠龄增加,其含量逐渐下降。结果提示:①造模组Wistar 大鼠每天加入4 %NaCl液体500ml,共持续10周时间,所有大鼠都出现了高血压,说明长期高盐饮食可以形成高血压,建议我们平时最好低盐饮食;②2月龄高盐饮食高血压WR脑干和血浆中 ET水平明显高于同龄正常血压的WR脑干和血浆中 ET含量(P<0.01),而 12月龄的正常血压WR的脑干和血浆ET和血浆CGRP 含量低于2月龄WR的含量(P<0.01)。③高血压WR的脑干和血浆ET和血浆CGRP 含量的变化说明,高血压的维持和发展可能与其高水平的ET含量以及较低水平的CGRP 含量有关。
有报道[5],在高血压状态下, 脑组织缺血范围比正常血压状态下大,而且恢复差, 除与侧支循环血管的损害有关外,也可能与ET 的过量释放有关。本实验结果说明, 在中枢和外周高水平的ET 含量和较低水平的CGRP 含量可能与高血压的形成、维持和发展有关。局部脑缺血后, ET在高血压状态下持续处于高水平,不利于侧支循环的开放,而可能加速缺血性脑损伤的发生和发展, 此亦可能是临床高血压性脑梗塞患者恢复慢,疗效差的一个重要原因。参考文献
[1] 彭英, 黄如训, 李湘平, 等. 高血压致脑血管损害及其对脑梗塞影响的实验研究[J].中华医学杂志2011,14(11): 100
[2] 马维红,李琦.高血压流行及危险因素调查现状[J].内科,2010,2(15):201-203
关键词:ET CGRP 高血压 高盐饮食【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1008-1879(2012)12-0016-02
1 材料与方法
1.1 实验动物。2月龄Wistar大鼠( WR)100只,体重90~140g,12月龄Wistar大鼠( WR)50只,体重100~160g,购自西安交通大学医学院实验动物中心, 将2月龄Wistar大鼠( WR)随机分为2组,即:对照组50只,造模组50只,12月龄Wistar大鼠( WR)50只装在一个笼子内。3组大鼠分装在3个大的动物饲养笼中,在同一条件下,用颗粒型普通大鼠饲料喂养,饮用自来水,适应性喂养1周。
1.2 高盐饮食高血压动物模型建立。将3组大鼠同样喂养的基础上,给造模组50只WR每天加入4 %NaCl液体500ml, Wistar 大鼠每天自由饮用,共持续10周时间[3]。
1.3 样本收集及测定。10周实验结束后,将所有大鼠,用20%乌拉(0.6ml/100mg)胸腔内注射麻醉,打开胸腔在胸主动脉采血,采血量5ml/只,并立即移入离心管,迅速放入全自动高速冷冻離心机里,以3500r/min离心15min,取50μl上清液。同时迅速将取过血液的大鼠置于冰盘上断头分离脑干、称重,沸水浴10分钟,置玻璃匀浆器, 加入1 mol/ L 预冷的醋酸( w / v = 1∶5) 匀浆, 低温离心( 4500rpm×10min,4℃),取上清液置于聚丙乙烯塑料试管中加 PELH 液补充至 3ml,所取血液迅速置于含 10% EDTANa2501和1001抑肽酶试管中, 混匀低温离心( 4500rpm×10min, 4℃) , 取上清液置于聚丙乙烯塑料试管中,所有样本均置于-70℃低温冰箱中保存。样本收集齐后一次性用南京建成出品的ET 和CGRP 放免药盒进行测试,操作程序严格按各药盒说明进行。
1.4 统计处理。各组测定结果以表示, 用电子计算机进行各组均数和各组均数间差别显著性检验(P检验)。
2 结果
表1 各组大鼠脑ET、CGRP 的变化比较( n=50只)
组别ET(pg/mg)CGRP(pg/ml)对照组Ⅰ7.76±2.07**105.4±27.63对照组Ⅱ6.37±1.9498.37±27.69造模组16.07±2.35157.26±32.81**表2 各组大鼠血浆ET、CGRP 的变化比较(X±S,n=50只)
组别ET(pg/mg)CGRP(pg/ml)对照组Ⅰ7.76±2.07**157.26±32.81**对照组Ⅱ6.37±1.9441.02±27.50造模组1.91±5.18**395.43±40.003 讨论
本课题采用动物作为实验研究对象,研究高血压的病因及生化指标的变化,课题结果显示: 2月龄WR高盐饮食高血压WR脑干和血浆中 ET水平明显高于同龄正常血压WR的含量(P<0.01),而 12月龄的正常血压的WR脑干和血浆ET含量又明显高于2月龄的含量(P<0.01)。2月龄高盐饮食高血压WR脑干和血浆 CGRP 含量低于2月龄和12月龄WR的含量,并随鼠龄增加,其含量逐渐下降。结果提示:①造模组Wistar 大鼠每天加入4 %NaCl液体500ml,共持续10周时间,所有大鼠都出现了高血压,说明长期高盐饮食可以形成高血压,建议我们平时最好低盐饮食;②2月龄高盐饮食高血压WR脑干和血浆中 ET水平明显高于同龄正常血压的WR脑干和血浆中 ET含量(P<0.01),而 12月龄的正常血压WR的脑干和血浆ET和血浆CGRP 含量低于2月龄WR的含量(P<0.01)。③高血压WR的脑干和血浆ET和血浆CGRP 含量的变化说明,高血压的维持和发展可能与其高水平的ET含量以及较低水平的CGRP 含量有关。
有报道[5],在高血压状态下, 脑组织缺血范围比正常血压状态下大,而且恢复差, 除与侧支循环血管的损害有关外,也可能与ET 的过量释放有关。本实验结果说明, 在中枢和外周高水平的ET 含量和较低水平的CGRP 含量可能与高血压的形成、维持和发展有关。局部脑缺血后, ET在高血压状态下持续处于高水平,不利于侧支循环的开放,而可能加速缺血性脑损伤的发生和发展, 此亦可能是临床高血压性脑梗塞患者恢复慢,疗效差的一个重要原因。参考文献
[1] 彭英, 黄如训, 李湘平, 等. 高血压致脑血管损害及其对脑梗塞影响的实验研究[J].中华医学杂志2011,14(11): 100
[2] 马维红,李琦.高血压流行及危险因素调查现状[J].内科,2010,2(15):201-203