【摘 要】
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目的 探讨HCV核心蛋白与非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞增殖的影响及可能机制.方法 重组质粒pcDNA3.1(-)Core与pcDNA3.1(-)NS4B单独和联合转染HepG2细胞,同时以转染空载体和未转染HepG2细胞作为对照.RT-PCR及Western Blot检测各组细胞中HCVCore、NS4B 、Wnt1、β-catenin 、c-myc及CyclinD1表达;MTT法,
【机 构】
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湖南长沙410087中南大学湘雅医院感染科,湖南长沙410087中南大学湘雅医院感染科,南华大学附属第一医院感染科,南华大学附属第一医院感染科,南华大学附属第一医院感染科
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目的 探讨HCV核心蛋白与非结构蛋白4B(NS4B)对HepG2细胞增殖的影响及可能机制.方法 重组质粒pcDNA3.1(-)Core与pcDNA3.1(-)NS4B单独和联合转染HepG2细胞,同时以转染空载体和未转染HepG2细胞作为对照.RT-PCR及Western Blot检测各组细胞中HCVCore、NS4B 、Wnt1、β-catenin 、c-myc及CyclinD1表达;MTT法,平板克隆形成试验检测HCV核心蛋白与NS4B对HepG2细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期.结果 ①pcDNA3.1(-)Core与pcDNA3.1(-)NS4B单独和联合转染HepG2细胞,成功表达HCV Core或/(和)NS4B mRNA和蛋白.②pcDNA3.1(-)Core和pcDNA3.1(-)NS4B单独转染和联合转染的HepG2细胞Wnt1、β-catenin、c-myc、CyclinD1 mRNA与蛋白的相对表达量均高于HepG2/pcDNA3.1(-)组和HepG2组(P<0.01).③与HepG2/pcDNA3.1(-)组和HepG2组比较,pcDNA3.1(-)Core和pcDNA3.1(-) NS4B单独转染和联合转染的HepG2细胞活力和克隆形成能力增强,S期和G2/M期细胞比例升高(P<0.01).结论 HCV核心蛋白与NS4B能加速HepG2细胞周期进程,促进细胞增殖,这种效应可能与其增强Wnt1、β-catenin、c-myc及CyclinD1的表达相关。
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