【摘 要】
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流式分选术是对细胞或生物颗粒进行无菌筛分的技术,因具有检测速度快、通量高、灵敏度高等优势,故在医学及生命科学领域有广阔的应用前景.离心是流式分选后富集细胞的常用技术,直接影响流式分选后样本的细胞活性和得率.该文以KPC细胞系(即小鼠胰腺组织特异性kras缺失p53突变形成胰腺癌分离的癌细胞,简称KPC)和小鼠原代脾脏细胞为例,利用FACS SORP Aria Ⅱ分选仪进行分选.对离心力、离心时间等参数进行优化,结果表明KPC细胞分选后,300 ×g、4℃离心25 min,能获得高得率高活性的细胞用于下游实
【机 构】
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浙江大学医学院公共技术平台,杭州310058;浙江大学基础医学院,杭州310058
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流式分选术是对细胞或生物颗粒进行无菌筛分的技术,因具有检测速度快、通量高、灵敏度高等优势,故在医学及生命科学领域有广阔的应用前景.离心是流式分选后富集细胞的常用技术,直接影响流式分选后样本的细胞活性和得率.该文以KPC细胞系(即小鼠胰腺组织特异性kras缺失p53突变形成胰腺癌分离的癌细胞,简称KPC)和小鼠原代脾脏细胞为例,利用FACS SORP Aria Ⅱ分选仪进行分选.对离心力、离心时间等参数进行优化,结果表明KPC细胞分选后,300 ×g、4℃离心25 min,能获得高得率高活性的细胞用于下游实验,而小鼠原代脾脏细胞则300 ×g、4℃离心15 min最为合适.该方法解决了流式分选后细胞离心难、离心损失大的问题,可提高分选实验实际得率,为流式分选术的应用提供技术参考.
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该研究建立了基于CRISPR-Cas13a系统的斑马鱼基因表达下调体系,并对其效果和特异性进行了检测分析.以斑马鱼报告基因egfp和内源性基因ta、fabp11a为研究对象,设计并合成靶向靶标基因的crRNA及其突变体,构建Cas13a及其突变体(dCas13a)的表达质粒,在体外合成Cas13a-mRNA和dCas 13a-mRNA(dCas 13a),分别与各crRNA共注射至野生型AB和egfp转基因斑马鱼胚胎中,通过表型观察及qRT-PCR技术验证靶标基因表达下调的情况.结果 表明,Cas13a-
结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T-cell lymphoma,ENKTCL)是非霍奇金淋巴瘤中一种少见的亚型,其发病机制包括EB病毒感染、ENKTCL相关基因异常、信号通路的异常活化、肿瘤微环境的改变,该病病程进展快,预后较差,预后模型包括Ann Arbor分期模型、国际预后指数(IPI)模型、韩国预后指数(KPI)模型、PINK-E模型、Nomogram风险指数(NRI)模型,同时临床上已发现越来越多ENKTCL的独立预后因素,这对于ENKTCL的风险评估有着积极意义.目前,ENK
组蛋白是染色质的重要组成部分,其含量的高低显著影响着染色质高级结构的形成、基因表达、DNA复制等重要生命活动.蛋白质降解是组蛋白含量调控的重要机制,大量研究表明,组蛋白的降解与其氨基酸残基的修饰方式有着密不可分的联系.此外,组蛋白的降解与其泛素化、乙酰化等共价修饰密切相关.该文以组蛋白氨基酸残基翻译后修饰(PTM)为关注点,重点介绍组蛋白降解与氨基酸残基修饰之间的相互关系,并对该领域的研究进展进行综述.
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瞬时受体电位通道6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)是瞬时受体电位离子通道家族的成员之一,属于非选择性阳离子通道.TRPC6广泛分布于大脑、神经、心脏、血管、肺、肾、胃肠道等器官组织中,可被渗透压变化、机械刺激、二酰基甘油激活,进而参与体内多种疾病的病理生理过程.研究发现,TRPC6的失调与心血管系统疾病的发病机制关系密切,且TRPC6与心血管疾病关系的研究成为近来热点.该文主要介绍TRPC6的结构特点及其与心血管系统相关疾病关系的最
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