【摘 要】
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目的 探讨Tal1对T-ALL细胞增殖及其机制的影响.方法 用Tal1慢病毒感染T-ALL细胞株Jurkat,建立稳定的Tal1敲降细胞株(Jurkat-siTal1)和Tal1过表达细胞株(Jurkat-T1),及siRNA阴
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院临床分子医学中心//儿童发育疾病研究教育部重点实验室//儿科学重庆市重点实验室//重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地,重庆,400014
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目的 探讨Tal1对T-ALL细胞增殖及其机制的影响.方法 用Tal1慢病毒感染T-ALL细胞株Jurkat,建立稳定的Tal1敲降细胞株(Jurkat-siTal1)和Tal1过表达细胞株(Jurkat-T1),及siRNA阴性对照细胞(Jurkat-mock1)和过表达阴性对照细胞(Jurkat-mock2).CCK-8检测细胞生长能力;流式细胞术检测细胞周期;Real-time RT-PCR和Western blot检测周期蛋白依赖性激酶抑制因子2(CDKN2A)、周期蛋白依赖性激酶抑制因子1(CDKN2B)mRNA和蛋白表达.结果 成功建立Jurkat稳定转染细胞株.CCK8结果表明细胞Jurkat-T1与Jurkat-mock2相比,细胞生长更快,而Jurkat-siTal1与Jurkat-mock1相比,细胞生长明显减缓.流式细胞术检测细胞周期发现,Jurkat-siTal1与Jurkat-mock1相比G0/G1期增加,S期减少;而Jurkat-T1与Jurkat-mock2相比,G0/G1期减少,S期增加.Real-time RT-PCR和Western blot结果显示Tal1抑制Jurkat细胞内CDKN2A、CDKN2B的mRNA和蛋白表达.结论Tal1可以促进T淋巴白血病细胞Jurkat增殖;促进Jurkat细胞由G0/G1期向S期转换,其可能通过Tal1抑制G0/G1和S期负调控蛋白CDKN2A、CDKN2B的表达.
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