目的 评价蛋白激酶B(AKT)和蛋白激酶Cθ(PKCθ)与吗啡抑制辅助性T淋巴细胞(Th细胞)分化的关系.方法 取20名健康成年志愿者静脉血样各20 ml,采用密度梯度离心法提取外周血单个核细胞(PB MC),采用免疫磁珠分离法提取纯CD4+T淋巴细胞.采用随机数字表法,将CD4+T淋巴细胞分为4组(n=3):对照组(C组)不给予任何处理;PI组加入佛波酯(PMA)25 ng/ml+钙离子载体(Ion)1 μg/ml;吗啡组(M组)加入PMA 25 ng/ml+Ion 1 μg/ml+吗啡50 ng/ml;纳洛酮组(N组)加入PMA 25 ng/ml+Ion 1 μg/ml+吗啡50 ng/ml+纳洛酮50 ng/ml.细胞置于37℃5％CO2细胞培养箱中孵育4h.采用流式细胞分析法测定IFN-γ和IL-4的表达,以IFN-γ表达反映Th1细胞亚群比例,以IL-4表达反映Th2细胞亚群比例,计算Th1/Th2比值.采用Western blot法检测AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、PKCθ和磷酸化PKCθ(p-PKCθ)的表达,计算p-AKT/AKT比值和p-PKCθ/PKCθ比值,分别反映AKT和PKCθ的活性.结果 与C组比较,PI组、M组和N组Th1、Th2细胞亚群比例、Th1/Th2比值升高,PI组和N组AKT和PKCθ的活性升高,M组PKCθ活性升高(P＜0.05).与PI组比较,M组Th1细胞亚群比例、Th 1/Th2比值和AKT活性降低,N组Th1/Th2比值降低(P＜0.05),M组和N组PKCθ活性差异无统计学意义(P＞0.05).与M组比较,N组Th1细胞亚群比例、Th1/Th2比值和AKT活性升高(P＜0.05),PKCθ活性差异无统计学意义(P＞0.05).结论 吗啡通过激活阿片受体抑制Th细胞分化的机制与抑制AKT的激活有关,与PKCθ无关。
AKT和PKCθ与吗啡抑制辅助性T淋巴细胞分化的关系
【摘 要】
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目的 评价蛋白激酶B(AKT)和蛋白激酶Cθ(PKCθ)与吗啡抑制辅助性T淋巴细胞(Th细胞)分化的关系.方法 取20名健康成年志愿者静脉血样各20 ml,采用密度梯度离心法提取外周血单个核细胞(PB MC),采用免疫磁珠分离法提取纯CD4+T淋巴细胞.采用随机数字表法,将CD4+T淋巴细胞分为4组(n=3):对照组(C组)不给予任何处理;PI组加入佛波酯(PMA)25 ng/ml+钙离子载体(I
【机 构】
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210029南京医科大学第一附属医院麻醉科,210029南京医科大学第一附属医院麻醉科,210029南京医科大学第一附属医院麻醉科
【出 处】
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中华麻醉学杂志
【发表日期】
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2014年34期
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