探讨芦荟大黄素对大肠癌LOVO细胞自噬相关通路Akt/mTOR、凋亡及迁移的影响。
方法将大肠癌LOVO细胞分为对照组(正常培养)、低剂量组(LOVO细胞+10 μmol/L芦荟大黄素培养30 min)、中剂量组(LOVO细胞+30 μmol/L芦荟大黄素培养30 min)和高剂量组(LOVO细胞+50 μmol/L芦荟大黄素培养30 min)。采用CCk-8法检测各组细胞培养24、48、72 h细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;采用Transwell小室检测各组细胞迁移能力;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞IC3-Ⅰ、IC3-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、Akt及p-Akt的表达。
结果低剂量组LOVO细胞增殖抑制率、迁移能力、凋亡率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组LOVO细胞增殖抑制率、迁移能力降低,凋亡率增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量依赖性(P<0.05)。低剂量组细胞检测IC3-Ⅰ、IC3-Ⅱ、Beclin-1、mTOR、p-mTOR、Akt及p-Akt表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),中、高剂量组IC3-Ⅰ、IC3-Ⅱ、Beclin-1表达增加(0.43 ± 0.03、0.59 ± 0.04比0.16 ± 0.00,0.57 ± 0.07、1.06 ± 0.17比0.34 ± 0.02,0.37 ± 0.02、0.49 ± 0.01比0.13 ± 0.00),mTOR、p-mTOR、Akt及p-Akt表达减少(0.85 ± 0.08、0.37 ± 0.02比2.08 ± 0.07,1.42 ± 0.09、1.19 ± 0.02比1.97 ± 0.11,0.97 ± 0.00、0.84 ± 0.06比1.19 ± 0.02,0.43 ± 0.02、0.31 ± 0.01比0.98 ± 0.08),与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量依赖性(P<0.05)。
结论芦荟大黄素可能通过降低Akt/mTOR信号通路表达及其磷酸化水平,达到诱导大肠癌LOVO细胞自噬、凋亡,并抑制其生长、迁移能力的作用。