RP-HPLC法测定兔眼各组织中多柔比星的浓度

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目的建立测定兔眼各组织中多柔比星浓度的RP-HPLC法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱为DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈∶0.2mol/L磷酸二氢钾缓冲液∶三乙胺(30∶70∶0.2),磷酸调pH到4.0;检测波长234nm;内标为柔红霉素;甲醇沉淀蛋白,固相萃取富集。结果在兔眼各组织中,多柔比星和内标保留时间合适,分离效果良好;在0.1~10μg/ml的浓度范围内线性关系良好,r>0.999;各组织中日内与日间精密度分别小于3.70%和3.39%,低、中、高浓度,各组织回收率接近100%,提取率、定量限和检测限均符合要求。结论所建立的RP-HPLC法测定兔眼各组织中多柔比星的含量准确可靠。
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