【摘 要】
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目的 研究丁苯酞调节糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)炎症反应的机制.方法 采用OG
【机 构】
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嘉兴市第二医院,浙江嘉兴,314001
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目的 研究丁苯酞调节糖氧剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)炎症反应的机制.方法 采用OGD方法处理HBMEC,将细胞分为对照组、模型组和丁苯酞低、中、高剂量组.其中对照组为正常培养的HBMEC,模型组为OGD处理的细胞,低剂量组为OGD+5 μmol·L-1的丁苯酞,中剂量组为OGD+10 μmol·L-1的丁苯酞,高剂量组为OGD+20 μmol·L-1的丁苯酞.采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,CCK-8法检测细胞活力的变化,Western-Blot法检测细胞中HMGB1、TLR4、NF-κB(p-P65)、caspase-1和procaspase-1的表达水平,免疫酶联法检测上清中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素6(IL-6)的分泌水平.实时荧光定量PCR检测HMGB1、TLR4、NF-κB(P65)、caspase-1、IL-1β的mRNA表达.结果 OGD处理可以诱导HBMEC活力下调和HBMEC细胞凋亡,且具有时间依赖性,相比对照组具有显著性差异(P＜0.05);而丁苯酞干预后,HBMEC细胞活力比模型组显著上调(P＜0.05),细胞凋亡率比模型组显著下降(P＜0.05). OGD处理可以导致HBMEC中HMGB 1-TLR4-NF-κB信号的激活,诱导炎症因子caspase-1、IL-1β的表达上调,相比对照组具有显著性差异(P＜0.05);而丁苯酞干预可以显著下调HMGB 1-TLR4-NF-1cB信号的表达,下调caspase-1、IL-1β3的表达.结论 丁苯酞可能通过抑制HMGB 1-TLR4-NF-κB信号的表达调节OGD下HBMEC细胞炎症反应.
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