【摘 要】
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为了构建肺炎克雷伯氏菌感染小鼠乳腺炎模型,初步探究小鼠乳腺炎发病的分子机制,试验采用传统细菌培养方法从奶样中分离出致病菌,提取基因组DNA进行PCR快速检测和测序比对。选取12只泌乳Balb/c小鼠,每只小鼠的一侧乳区注射100μL生理盐水作为对照组,在对侧乳区注射100μL浓度为1×109 cfu/mL的肺炎克雷伯氏菌菌液作为感染组。在注射后第1,2,4,8天依次取样,每次3只。采用H.E.染色
【机 构】
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安徽师范大学生命科学学院重要生物资源保护与利用研究安徽省重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目（31970413）； 国家重点研发计划项目（2018YFC1200201）； 安徽省自然科学基金项目（1908085MC83）；
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为了构建肺炎克雷伯氏菌感染小鼠乳腺炎模型,初步探究小鼠乳腺炎发病的分子机制,试验采用传统细菌培养方法从奶样中分离出致病菌,提取基因组DNA进行PCR快速检测和测序比对。选取12只泌乳Balb/c小鼠,每只小鼠的一侧乳区注射100μL生理盐水作为对照组,在对侧乳区注射100μL浓度为1×109 cfu/mL的肺炎克雷伯氏菌菌液作为感染组。在注射后第1,2,4,8天依次取样,每次3只。采用H.E.染色法观察小鼠乳腺组织的病理变化,实时荧光定量PCR法检测炎症相关基因炎症小体3（NLRP3）、Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）基因的相对表达量。结果表明:试验成功从奶样中分离并鉴定得到肺炎克雷伯氏菌。对照组小鼠第1,2天乳腺腺泡组织结构完整,轮廓清晰,第4,8天乳腺上皮细胞发生溶解并伴有少量脂肪细胞浸润;感染组小鼠的主要病理变化为乳腺上皮细胞之间排列松散,伴有大量脂肪细胞浸润,并且随着感染时间延长小鼠乳腺组织的病理变化越来越明显。感染组小鼠乳腺组织中NLRP3和TLR2基因的相对表达量与对照组相比极显著升高（P＜0.01）,TLR4基因的相对表达量与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。说明试验成功构建出肺炎克雷伯氏菌小鼠乳腺炎模型,TLR2、NLRP3基因参与肺炎克雷伯氏菌小鼠乳腺炎的发生,TLR4基因的相对表达量无显著变化。
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