检测金属硫蛋白1H(MT1H)在儿童和青少年骨肉瘤血清中的表达，分析MT1H与临床病理特征的关系，并探讨MT1H对人骨肉瘤细胞U2OS增殖能力的影响及其机制。
方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测MT1H在儿童和青少年骨肉瘤和骨良性疾病中表达情况，分析MT1H表达和骨肉瘤临床病理特征之间的关系。在体外将MT1H基因转染人骨肉瘤细胞U2OS，采用反转录聚合酶链反应(RT－PCR)和Wes－tern blot方法检测MT1H mRNA和蛋白的表达情况，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖，采用Western blot方法检测核因子(NF)－κB、抑制性κB(IκB)－α蛋白表达情况。
结果MT1H在骨良性疾病和骨肉瘤血清中的表达水平分别为(0.51±0.52) μg/L和(2.17±0.78) μg/L，其在骨肉瘤血清中的表达水平明显升高(t＝－8.966，P<0.05)。MT1H在Ⅰ～ⅡA期、ⅡB～Ⅲ期骨肉瘤血清中的表达水平分别为(1.98±0.69) μg/L、(2.45±0.82) μg/L，其表达水平呈逐渐升高趋势，差异有统计学意义(t＝－2.343，P<0.05)。转染MT1H基因后，骨肉瘤细胞MT1H mRNA和蛋白表达均升高(均P<0.05)。MTT结果显示，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H真核质粒转染骨肉瘤细胞系U2OS 72 h后，细胞增殖加快。空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组A值分别为0.38±0.03、0.36±0.03、0.42±0.03；与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组A值升高(F＝4.213，P<0.05)。Western blot检测显示，空白对照组、空质粒转染组、MT1H转染组细胞中NF－κB的相对表达量分为0.56±0.05、0.53±0.05、0.92±0.07，IκB－α蛋白的相对表达量分别为0.64±0.06、0.62±0.09、0.34±0.08，与空白对照组、空质粒转染组相比，MT1H转染组NF－κB蛋白表达上调、IκB－α蛋白表达下调(F＝44.581、14.927，均P<0.05)。
结论MT1H在儿童和青少年骨肉瘤血清中表达升高，并且分期越晚，表达越高，体外可能通过增强NF－κB信号通路，促进细胞增殖。