【摘 要】
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目的 探究木犀草苷对MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法 不同浓度(12.5、25、50μmol/L)木犀草苷处理细胞后,采用CCK-8、克隆形成、流式细胞术检测该成分对MCF-7细胞增殖、克隆形成、凋亡的影响.采用划痕和Transwell实验,检测MCF-7细胞的迁移和侵袭能力.利用分子对接技术,预测木犀草苷与钙蛋白酶-2(Calpain-2)蛋白的结合能力.通过Western blot实验,检测木犀草苷对MCF-7细胞中Calpain-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院生理教研室, 贵州 贵阳550025;贵阳市妇幼保健院, 贵州 贵阳550004
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目的 探究木犀草苷对MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制.方法 不同浓度(12.5、25、50μmol/L)木犀草苷处理细胞后,采用CCK-8、克隆形成、流式细胞术检测该成分对MCF-7细胞增殖、克隆形成、凋亡的影响.采用划痕和Transwell实验,检测MCF-7细胞的迁移和侵袭能力.利用分子对接技术,预测木犀草苷与钙蛋白酶-2(Calpain-2)蛋白的结合能力.通过Western blot实验,检测木犀草苷对MCF-7细胞中Calpain-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、细胞核增殖抗原蛋白(PCNA)、髓样细胞白血病蛋白-1(Mcl-1)、B淋巴细胞瘤蛋白-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)表达的影响.结果 木犀草苷能抑制MCF-7细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭,诱导细胞凋亡(P<0.05),与Calpain-2的活性口袋稳定结合,减少乳腺癌MCF-7细胞中Calpain-2蛋白、间充质标记蛋白N-cadherin和Vimentin、细胞增殖相关蛋白PCNA及抗凋亡蛋白Mcl-1和Bcl-2表达(P<0.05),增加上皮标记蛋白E-cadherin和促凋亡蛋白Bax表达(P<0.05).结论 木犀草苷具有抑制乳腺癌MCF-7细胞生存能力、迁移、侵袭的作用,可能与其靶向抑制Calpain-2的蛋白表达有关.
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